期刊简介
本刊办刊宗旨： 中国热带医学贯彻“预防为主，面向国内外”的办刊方针，突出热带医学与公共卫生特色，促进有关学科发展。介绍防治、研究成果、公共卫生和妇幼保健等经验，介绍国内外在热带病防治与研究中的新技术、新进展及发展趋势，并力求促进国内外的学术交流与合作。以严谨的技术性，科学性、知识性、实用性，竭诚为全国医疗、卫生、医药、环保部门的科研、管理人员和医药院校师生，尤其是广大基层医疗、卫生战线的同志们服务。栏目设置：述评、 论著、疾病控制、临床诊治、传统医学、检验技术、卫生监测、公共卫生、研究进展、理论探讨、科技信息、媒介防制、营养与食品等。报道内容： 主要报道传染病，非传染病和病因不明疾病的防治研究，如各种寄生虫病、细菌性疾病、病毒性疾病、真菌病、立克次体病、螺旋体病、性病、皮肤病、艾滋病、营养缺乏或过多病、物理病、职业卫生、中毒、贫血、社区卫生、环境卫生等。其 它： 本刊被 < 中国期刊全文数据库 >（CNKI）、
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首页>中国热带医学杂志
- 杂志名称：中国热带医学杂志
- 主管单位：国家卫生和计划生育委员会
- 主办单位：中华预防医学会;海南疾病预防控制中心
- 国际刊号：1009-9727
- 国内刊号：46-1064/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：中国预防医学会优秀期刊奖期刊收录：上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
CHIKV Real-time PCR检测方法的建立及试剂盒研发
郑丽兰；冯海欢；陈鑫华；张驰；邓茗芝；王晓萌；杨淑君；彭鸿娟
关键词：基孔肯雅病毒, 荧光定量PCR, 检测试剂盒
摘要：目的 建立快速特异检测基孔肯雅病毒的Real-time PCR方法及试剂盒.方法 根据发表在Genbank上15株基孔肯雅病毒基因序列全长,应用ClustalW2.0和DNAMAN8软件筛选出位于其E1基因上的种内保守种间特异的目的片段,并据此设计出优引物.人工合成该基因片段并构建重组质粒,对重组质粒梯度稀释后,再利用SYBR Green Ⅰ Real-time PCR的方法检测该特异基因的浓度,建立标准品曲线,用于临床上基孔肯雅病毒的早期诊断.结果 琼脂糖凝胶电泳结果显示,标准品的PCR扩增产物的电泳条带长度与目标条带一致,测序结果显示与目标条带序列一致,说明引物与阳性质粒性能良好.经优化确定CHIKV荧光定量PCR反应体系中佳的引物浓度为350 nmol/L,佳的反应条件为:50℃ 2 min;95℃预变性2 min;以95℃ 15s,60℃ 15 s,72℃ 1 min进行40个循环扩增,在72℃进行荧光采集.根据荧光定量PCR熔解曲线出现特异性单峰,并对黄病毒属成员登革病毒和寨卡病毒的检测为阴性,表明该检测方法特异性高;检测阈值达302拷贝,显示敏感性好,重复试验的变异系数均小于0.1％,说明该实验设计稳定性良好.结论 基于该方法的试剂盒具有特异性好、灵敏度高、重复性好、能够快速定量等优点,有利于临床上基孔肯雅病毒的早期诊断,具有良好的应用前景.
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