期刊简介

               本刊办刊宗旨: 中国热带医学贯彻“预防为主,面向国内外”的办刊方针,突出热带医学与公共卫生特色,促进有关学科发展。介绍防治、研究成果、公共卫生和妇幼保健等经验,介绍国内外在热带病防治与研究中的新技术、新进展及发展趋势,并力求促进国内外的学术交流与合作。以严谨的技术性,科学性、知识性、实用性,竭诚为全国医疗、卫生、医药、环保部门的科研、管理人员和医药院校师生,尤其是广大基层医疗、卫生战线的同志们服务。栏目设置:述评、 论著、疾病控制、临床诊治、传统医学、检验技术、卫生监测、公共卫生、研究进展、理论探讨、科技信息、媒介防制、营养与食品等。报道内容: 主要报道传染病,非传染病和病因不明疾病的防治研究,如各种寄生虫病、细菌性疾病、病毒性疾病、真菌病、立克次体病、螺旋体病、性病、皮肤病、艾滋病、营养缺乏或过多病、物理病、职业卫生、中毒、贫血、社区卫生、环境卫生等。其 它: 本刊被 < 中国期刊全文数据库 >(CNKI)、

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  • 杂志名称:中国热带医学杂志
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心
  • 国际刊号:1009-9727
  • 国内刊号:46-1064/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国预防医学会优秀期刊奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国热带医学杂志2017年第02期

人IFN-γ与GM-CSF融合基因重组BCG表达与鉴定

尹国才;李运清;杨媛媛;谭文彬;薛庆节;陈廷

关键词:卡介苗, 融合基因GMI-γ, 基因重组
摘要:目的 构建人IFN-γ与GM-CSF融合基因的卡介苗(BCG)重组质粒,并在卡介苗中分泌表达人IFN-γ与GM-CSF蛋白.方法 采用反转录PCR,分别获得人IFN-γ与GM-CSF基因编码序列的cDNA.将IFN-γ与GM-CSF基因进行PCR扩增,通过接头(Gly4 Ser)3将其连接,形成融合基因,将融合基因插入到pMV261质粒HSP60启动子下游,构建一个分泌型的卡介苗-大肠杆菌穿梭表达质粒pMVGMI-γ.转化感受态细胞E.coli DH5α,在LB培养基平板上进行卡那霉素抗性选择,选择阳性克隆提取质粒后转化感受态BCG,用(NH4)2SO4沉淀、分子筛层析柱Bio-Gel P-6 DG纯化目的蛋白,10% SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化结果,Western-blot检测人IFN-γ与GM-CSF基因在rBCG中的表达.结果 目的基因GM-CSF和IFN-γRT-PCR产物大小分别为461 bp和432 bp,与预期值一致.构建的重组质粒经双酶切、扩增及测序鉴定,融合基因GMI-γ(462+435-45=852 bp)正]确插入载体,成功转化入BCG感受态细胞,且正确表达.结论 融合基因GMI-γ修饰的rBCG构建成功并表达,为进一步探讨rBCG免疫活性及发展新型抗结核杆菌疫苗奠定了基础.