期刊简介

               本刊办刊宗旨: 中国热带医学贯彻“预防为主,面向国内外”的办刊方针,突出热带医学与公共卫生特色,促进有关学科发展。介绍防治、研究成果、公共卫生和妇幼保健等经验,介绍国内外在热带病防治与研究中的新技术、新进展及发展趋势,并力求促进国内外的学术交流与合作。以严谨的技术性,科学性、知识性、实用性,竭诚为全国医疗、卫生、医药、环保部门的科研、管理人员和医药院校师生,尤其是广大基层医疗、卫生战线的同志们服务。栏目设置:述评、 论著、疾病控制、临床诊治、传统医学、检验技术、卫生监测、公共卫生、研究进展、理论探讨、科技信息、媒介防制、营养与食品等。报道内容: 主要报道传染病,非传染病和病因不明疾病的防治研究,如各种寄生虫病、细菌性疾病、病毒性疾病、真菌病、立克次体病、螺旋体病、性病、皮肤病、艾滋病、营养缺乏或过多病、物理病、职业卫生、中毒、贫血、社区卫生、环境卫生等。其 它: 本刊被 < 中国期刊全文数据库 >(CNKI)、

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  • 杂志名称:中国热带医学杂志
  • 主管单位:国家卫生和计划生育委员会
  • 主办单位:中华预防医学会;海南疾病预防控制中心
  • 国际刊号:1009-9727
  • 国内刊号:46-1064/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:中国预防医学会优秀期刊奖期刊收录:上海图书馆馆藏, 万方收录(中), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美), 知网收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊)
中国热带医学杂志2011年第05期

维生素D受体特异性siRNA表达载体的构建

向伟;何小解;马燕琳;易著文;郑维;曾艳;赵水平;马志超;吴明;符生苗;马建林;王洁;康红

关键词:维生素D受体, 血管内皮细胞, 转染, 质粒
摘要:目的 通过构建维生素D受体(VDR)基因特异性siRNA(small interfering RNA)真核表达载体,检测其对血管内皮细胞(EC)中VDR基因的沉默作用,为进一步探讨VDR与心血管疾病发生发展关系的研究奠定基础.方法 构建小鼠VDR特异性siRNA表达栽体并测序,进行人EC/鼠EC的培养,进行siRNA转染试验,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率,Western blot进行鉴定.结果针对VDR基因的4个不同位点,设计、构建了4个siRNA干扰载体,经测序,序列全部正确.成功完成了人EC/鼠EC的培养及转染,荧光显微镜观察发现转染的重组质粒在EC内出现不同的转染效率,1号质粒的转粢效率约为65%,2号质拉的转染效率约为50%,3、4号质粒的转染效率比较低.取转染效率较高的1、2号质粒做进一步转染干预,转染72h后,采用Westem blot方法检测人EC/鼠EC内VDR蛋白质表达,与空白对照组比较,1、2号质粒在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用,而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号质粒抑制效果为明显,目的 蛋白10D/内参蛋白10D比值发现两干扰组在人EC中对VDR的表达无明显抑制作用.而在鼠EC中则有明显抑制作用,其中以1号干扰质粒抑制效果明显,抑制率达到了70%.结论成功完成了人EC/鼠EC的培养、转染及转染干预,并行Westem bloI鉴定,发现抑制效率明显的为鼠EC 1号质粒组.表明针对鼠VDR基因的siRNA表达载体有很强的特异性,并且对VDR基因干扰的位点不同表现的抑制效应不一.